姬姆萨染色液(Giemsa Stain,即用型)
姬姆萨色素(又称吉姆萨色素)是由天青Ⅱ与伊红混合而成,Giemsa 染色原理和结果与瑞氏染色基本相同,姬姆萨染色液对胞浆着色力较强,能较好的显示胞浆的嗜碱性程度,特 别是对血液和骨髓细胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗粒,着色清晰,但是对胞核着色偏深, 核结构显色不佳,故姬姆萨染液常与瑞氏染液联合使用。 Giemsa Stain 以进口的姬姆萨色素、甲醇为主要原料,含 特有衬染剂,经研磨配制而成,能呈现出清晰的细胞染色效果。经常用于组织切片、血液和细胞涂片、细菌、染色体显带、原生动物寄生 虫等染色。嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合,染粉红色,称为嗜酸性物质; 细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,染紫蓝色,称为嗜碱性物 质;中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染淡紫色,称为中性物质。
产品组成:
Giemsa Stain(即用型) 100ml 500ml RT 避 光
自备材料:
1、 甲醇、乙醇
2、 蒸馏水
3、 (可选)0.1%~0.5%乙酸
4、 显微镜
操作步骤(仅供参考):
(一)涂片染色
1、常规方法制备血液涂片或骨髓涂片,待涂片自然干燥后,用甲醇固定 2~3min。
2、将血液涂片或骨髓涂片放置染色架上,滴加 Giemsa Stain(即用型)覆盖涂片,室温或加
热染色 10~15min。
3、用自来水或蒸馏水从玻片一端缓慢的轻轻冲洗。
4、(可选)0.1%乙酸分化数秒。
5、干燥,镜检。
染色结果:
嗜酸性颗粒嗜碱性颗粒中性颗粒
(二)组织切片染色
1、常规固定组织,常规脱水包埋。
2、切片 5μm,常规脱蜡至水。
3、蒸馏水清洗 2 次,每次 1~2min。
粉红色紫蓝色淡紫色
4、入 Giemsa Stain(即用型),浸染 12~24h。蒸馏水稍清洗。
5、0.5%乙酸清洗 1~2min。自来水稍冲洗。
6、无水乙醇迅速脱水 3 次,每次 5~10s。
7、二甲苯透明,中性树脂封固。
染色结果:
细胞核 蓝色至紫色
胞质细胞
淡蓝色
结缔组织 淡红色
注意事项:
1、血液涂片或骨髓涂片应厚薄均匀,否则影响染色效果。
2、涂片染色中 Giemsa 染色后,请勿先去除染液或直接对涂片用力冲洗。
3、如果染色过深或过浅,应调整染色时间或染色液的浓度。
4、Giemsa 涂片染色和组织切片染色中,pH 值对染色有一定影响,载玻片应清洁、无酸碱污染,否则影响染色效果。
5、染色液经稀释后液面应金属光泽则表示染液有染色作用,否则染色液可能失效。
6、Giemsa 组织切片染色中,染色后需用大量 0.1~0.5%乙酸急速冲洗,避免浮面沉淀物
污染切片后难以洗脱。
7、0.5%乙酸分化常用于 Giemsa 组织切片染色,如有必要亦可用于细胞涂片,但其浓度应
适量下调。0.5%乙酸分化切片时,切片呈粉红色即可终止。
8、Giemsa 组织切片染色中,无水乙醇脱水要迅速,否则切片易褪色。
9、染色液可重复使用,但不宜重复多次,若有沉淀物应过滤后使用。
有效期: 24 个月有效。
詹纳斯绿B染色液(0.2%)说明书
http://www.yanjinbio.com/article/134.html