细胞外基质
细胞外基质(ECM)分布在组织细胞的外部空间,其成分由细胞类型决定,如:纤维细胞向胞外分泌I型胶原和纤粘连蛋白,而上皮细胞则分泌层粘连蛋白,.不同细胞类型相邻处的分泌情况会发生变化,如真皮内的纤维细胞和表皮内的上皮胶质细胞毗邻处,两种细胞分泌的胞外基质成分形成基膜层.胞外基质的复杂性是附着其上的细胞表型表达的重要影响因素,附着在胞外基质上的细胞类型的动态平衡控制基质的组成,而基质成分反过来又影响细胞表型[Kleinman et al.,2003,Zoubiane et al.,2003,Fata et al.,2004].因此一个处在增殖期的,迁移性的成纤维细胞需要分化期上皮细胞或神经细胞分泌不同有ECM成分.通常,培养细胞本身可以产生胞外基质,但一些造化细胞的原代培养.增殖及分化诱导需要人工提供外源性ECM.
胞外基质由胶原.层粘连蛋白,纤粘连蛋白,透明质酸,蛋白多糖及膜结合生长因子(或细胞因子)等各种成分组成[ALBERTS ET AL.,1997,2002].基质可以通过胶原和纤连蛋白等纯化成分混合制备而成,也可由细胞直接分泌产生ECM, 然后冲洗掉产基质细胞,接种上要被研究的细胞,或者由EHS小鼠肉瘤细胞直接产生胞外基质即可,它同matrigel 一样可商业购买.matrigel通常在细胞培养中用促进细胞分化和细胞形态发生,它与上皮细胞或内皮细胞层交织成网格状结构.
已经,确定,至少有两个过程需要与附着面相互作用:1黏附,实现细胞附着和铺展,这是细胞增殖必需的[Folkman and Moscona,1978];2专一性相互作用,这是一些特殊功能表达所必需的,如上皮细胞与基底膜,与细胞外其他基质成分或与结缔组织细胞的相互作用.Rojkind等[1980],Vlodavsky等[1980]和其他研究人员研究了细胞在其他与基底膜有关的天然材料的生长情况,发现天然基质和成分明确的基质大分子,如基质胶,Natrigel,胶原,层粘连蛋白,玻连蛋白等(B-D Biosciences,Invitriogen)都适于研究基质相互作用.
ECM能够提高细胞的生存,增殖和分化能力.由于存在原代动物体可能产生有害物的危险,所以ECM中须添加人工合成物质[Ido et al.,2004].现在纤粘连蛋白和层粘连蛋白市场上均有出售.
培养细胞的起源
细胞的附着和生长