鼠外周血中性粒细胞分离液 KIT说明书
 
 
本品用于分离豚鼠外周血中性粒细胞
 
 
【产品规格】
 
200ml/Kit
 
【产品组成】
 
为方便广大用户使用，试剂内容如下：
 

	名称	产品编号	规格
A	分离液 1		200ml
B	样本稀释液	2010C1119	200ml
C	清洗液（赠品）	2010X1118	200ml
D	红细胞裂解液（赠品）	NH4CL2009	100ml
E	红细胞沉降液（6%羟乙基淀粉）	HES-TBD550-80	80ml
F	说明书		1 份

 
【实验前准备】
 
适用仪器：最大离心力可达 1200g 的水平转子离心机
 
【检验方法】
 
全过程样本、试剂及实验环境均需在 20±2℃的条件下进行。
 

• 取一支 15ml 离心管，先加入分离液 1：3ml，后加入 80%浓度分离液 1 溶液（分离液 1：

 
样本稀释液=4：1 的混合液）：1.5ml，形成梯度界面。
 

• 制备血液样本：抗凝血液与红细胞沉降液按 1：1 比例混匀后，小心加于分离液梯度界面之上，800g 离心 20min。

 

• 离心后，血浆层下出现两层白色环状细胞层，取下层白色环状中性粒细胞层（会有少量红细胞混杂），加 3-5 倍体积清洗液混匀，400g 离心 10min。

 

• 离心后弃上清，后可通过两种方法去除红细胞。

 
方法一：细胞沉淀用红细胞裂解液去除红细胞（具体方法参见“红细胞裂解液说明书”）。
 
方法二：
 

• 细胞沉淀用 1ml 红细胞沉降液重悬，加于 3ml 分离液 1 之液面上，400g 离心 20min。

 

• 取白色环状细胞层，加 3-5 倍体积清洗液混匀，250g 离心 10min，重复洗涤 2-3 次，获

 
得目的细胞（如仍有少量红细胞混杂，使用红细胞裂解液去除红细胞）。
 
分离图例
 

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
【注意事项】
 

• 全过程样本、试剂及实验环境均需在 20±2℃的条件下进行。为获得最佳的实验结果，最好在取血 2h 内进行实验，血液存放时间越长，细胞分离效果越差。血液放置超过 6h 后分离效果更差甚至不能达到分离目的。

 

• 本实验最好不使用高聚合材质（如聚苯乙烯）的塑料制品，应使用无静电、低静电离心管及未经碱处理过后的玻璃制品，因为静电作用将导致细胞贴壁、碱处理的玻璃表面会变成毛面，影响细胞分离效果。

 

• 分离液用量大于血液样本时，分离效果更佳。

 

• 如实验后细胞得率或活性过低，请联系技术支持以寻求帮助，具体联系方式详见下方生产企业信息。

 

• 请勿使用具有红细胞保护成分的抗凝剂，否则影响分离效果（离心后，红细胞不能完全沉至离心管底部）。

 
【储存条件及有效期】
 
常温保存，有效期 2 年。本品易感染细菌，需无菌条件操作。无菌条件下操作，启
 
封后置常温保存。如 4℃保存，本分离液易出现白色结晶，影响分离效果。
 
【参考值（参考范围）】
 

	本实验中性粒细胞提取率大于 80%。
【相关实验技术方案】
1.	所获得中性粒细胞的培养技术。
2.	所获得中性粒细胞的核酸提取技术。