产品类别：血小板的分离
 
产品编号：PLA2011D
 
产品名称：狗外周血血小板分离液试剂盒
 
产品规格：200ml/KIT
 
产品价格：￥500.00元
 
本品用于分离狗外周血血小板


“XXXX”动物外周血血小板分离液实验方法
 
技术文档编号：TBD0049SOP
 
【产品规格】
 
200ml/Kit
 
【产品组成】
 
为方便广大用户使用，试剂内容如下：
 

	名称	产品编号	规格
A	XXXX 动物外周血血小板分离液		200ml
B	样本稀释液（赠品）	2010C1119	200ml
C	清洗液（赠品）	2010X1118	200ml
D	说明书		1 份

 
【实验前准备】
 
适用仪器：最大离心力可达 1200g 的水平转子离心机
 
【检验方法】
 
全过程样本、试剂及实验环境均需在 20±2℃的条件下进行。
 
方法一：
 

• 在 15ml 离心管中，首先取抗凝血加于分离液之液面上（抗凝血与分离液最佳比例 1：2）， 250-300g ，离心 15min（注：根据血液样本量确定离心条件，血液样本量越多，离心力越大，离心时间越长，具体离心条件需客户自行摸索，以达到最佳分离效果）。

 

• 离心后，此时离心管中由上至下分为四层。第一层为血小板血浆层。第二层为环状乳白色细胞层。第三层为透明分离液层。第四层为红细胞层。

 

• 用吸管小心吸取第一层血小板血浆层到另一 15ml 离心管中，往所得离心管中加入同体积样本稀释液（产品编号：2010C1119），混匀血小板（如需获得的富集血小板血浆则不需加入稀释液，直接取血浆层即得）。

 

• 500g，离心 20min，离心后弃上清。

 

• 向含有血小板沉淀的离心管中加入 10ml 清洗液（产品编号：2010X1118）混匀，离心450g，15min，弃上清后以 0.5ml 后续实验所需相应液体重悬目的细胞。

方法二（需获得血小板富集血浆的客户请勿选择此方法）：
 
1. 在 15ml 离心管中，先加入 4ml 分离液，再将分离液与样本稀释液 8：2 混合的液体 1ml

小心叠加于分离液之液面上形成梯度界面。
 

• 将抗凝血液样本 2-3ml 小心加于分离液之液面上，400g，离心 20min。

 

• 离心后，环状血小板层存在于血浆层中，取血小板层或血浆层（血小板层不明显时）于另一 15ml 离心管中。

 

• 后续试验同方法一中的步骤 5。

 
【注意事项】
 

• 全过程样本、试剂及实验环境均需在 20±2℃的条件下进行。为获得最佳的实验结果，最好在取血 2h 内进行实验，血液存放时间越长，细胞分离效果越差。血液放置超过 6h 后分离效果更差甚至不能达到分离目的。

 

• 本实验最好不使用高聚合材质（如聚苯乙烯）的塑料制品，应使用无静电、低静电离心管及未经碱处理过后的玻璃制品，因为静电作用将导致细胞贴壁、碱处理的玻璃表面会变成毛面，影响细胞分离效果。

 

• 吸取过多的血小板血浆层下层溶液会导致交界处单个核细胞混杂。

 

• 分离液用量大于血液样本时，分离效果更佳。

 

• 如实验后细胞得率或活性过低，请联系技术支持以寻求帮助。

 
【储存条件及有效期】
 
常温保存，有效期 2 年。本品易感染细菌，需无菌条件操作。无菌条件下操作，启
 
封后置常温保存。如 4℃保存，本分离液易出现白色结晶，影响分离效果。
 
【参考值（参考范围）】
 
本实验血小板提取率大于 80%。
 
下表为成年人外周血中各种细胞的数量及比例，用户可适当进行参考。
 

			红细胞		白细胞		血小板
				（4.0-10.0）×109
	含量（个/L）		（4.0-5.5）×1012	中性粒细胞	淋巴细胞	单核细胞	（1.0-3.0）×1011
				50%-70%	20%-40%	3%-8%
【相关实验技术方案】
1.		所获得血小板的酸提取技术。
2.		所获得目的细胞的鉴定方法
		A.流式细胞技术