产品类别：红细胞的分离
 
产品编号：RBC2012TP
 
产品名称：虎红细胞分离液试剂盒
 
产品规格：200ml/KIT
 
产品价格：￥1000.00元
 
本品用于分离虎红细胞




“XXXX”动物外周血红细胞分离液实验方法
 
技术文档编号：TBD0047SOP
 
【产品规格】
 
200ml/Kit
 
【产品组成】
 
为方便广大用户使用，试剂内容如下：
 

	名称	产品编号	规格
A	XXXX 动物外周血红细胞分离液		200ml
B	样本稀释液（赠品）	2010C1119	200ml
C	清洗液（赠品）	2010X1118	200ml
D	说明书		1 份

 
【实验前准备】
 
适用仪器:最大离心力可达 1200g 的水平转子离心机
 
【检验方法】
 
全过程样本、试剂及实验环境均需在 20±2℃的条件下进行。
 
首先取抗凝血按体积比 1:1 的比例加样本稀释液（产品编号：2010C1119）混匀，根据
 
稀释后的样本量大小，分以下两种情况：
 
情况 A：稀释后的血液样本量小于 5ml 时，实验方法如下：
 

• 取一支 15ml 离心管，先加入与稀释后样本等量的分离液（注：分离液最少不得少于 3ml）。

 

• 用吸管小心吸取稀释后的血液样本加于分离液液面上，600-900g，离心 25-30min（注：根据血液样本量确定离心条件，血液样本量越多，离心力越大，离心时间越长，具体离心条件需客户自行摸索，以达到最佳分离效果）。

 

• 离心后，此时离心管中由上至下分为四层。第一层为血浆层。第二层为环状乳白色淋巴细胞层。第三层为透明分离液层。第四层为红细胞层。

 

• 用吸管小心吸取第一、二、三层，弃去，在剩余红细胞层中加入 10ml 清洗液（产品编号：2010X1118），混匀细胞。
• 250g，离心 10min。

 

• 弃上清。

 

• 用吸管以 5ml 清洗液（产品编号：2010X1118）重悬所得细胞。

• 250g，离心 10min。

 

• 重复 6、7、8，弃上清后以 0.5ml 后续实验所需相应液体重悬细胞。

 
情况 B：稀释后的血液样本量大于等于 5ml 时，实验方法如下：
 

• 取一支适当的离心管，先加入与稀释后样本等量的分离液。

 

• 将经稀释后的血液样本小心加于分离液之液面上，650-950g（最大离心力可至 1000g），离心 25-30min。（注：根据血液样本量确定离心条件，血液量越多，离心力越大，离心时间越长，具体离心条件需客户自行摸索，以达到最佳分离效果。加入血液样本后，样本及分离液总体积不得超过离心管总体积的三分之二）。

 

• 剩余步骤同“情况 A”中步骤 3 至步骤 10。

 
【注意事项】
 

• 全过程样本、试剂及实验环境均需在 20±2℃的条件下进行。为获得最佳的实验结果，最好在取血 2h 内进行实验，血液存放时间越长，细胞分离效果越差。血液放置超过 6h 后分离效果更差甚至不能达到分离目的。

 

• 本实验最好不要使用高聚合材质（如聚苯乙烯）的塑料制品，应使用无静电、低静电离心管及未经碱处理过后的玻璃制品，因为静电作用将导致细胞贴壁、碱处理的玻璃表面会变成毛面，影响细胞分离效果。
• 如第一二三层吸不干净，会导致粒细胞等混杂。

 

• 如所实验后细胞得率或活性过低，请联系技术支持以寻求帮助。

 
【储存条件及有效期】
 
常温保存，有效期 2 年。本品易感染细菌，需无菌条件操作。无菌条件下操作，启
 
封后置常温保存。如 4℃保存，本分离液易出现白色结晶，影响分离效果。
 
【参考值（参考范围）】
 
本实验红细胞提取率及纯度均大于 80%。
 
下表为成年人外周血中各种细胞的数量及比例，用户可适当进行参考。
 

	红细胞		白细胞		血小板
		（4.0-10.0）×109
含量（个/L）	（4.0-5.5）×1012	中性粒细胞	淋巴细胞	单核细胞	（1.0-3.0）×1011
		50%-70%	20%-40%	3%-8%

 
【相关实验技术方案】