产品类别：红细胞的分离
 
产品编号：HES-TBD550
 
产品名称：羟乙基淀粉550(本公司专利产品)
 
产品规格：200ml/瓶
 
产品价格：￥180.00元
 
本公司专利产品：羟乙基淀粉商品名为HES-TBD550（羟乙基淀粉550），克分子渗透压为308 mosm／L，胶体渗透压为68／36 mmHg,可影响红细胞集聚性沉降率。红细胞集聚是可递性桥接结构形成的结果，由大的HES-TBD550（羟乙基淀粉550）分子处在红细胞之间联接而成。HES-TBD550（羟乙基淀粉550）同时还阻碍白细胞和内皮细胞的黏附，并使平均血小板容积呈现微弱地降低，从而有轻度抑制血小板集聚的功能。脐血经HES-TBD550（羟乙基淀粉550）处理后，可使红细胞沉积至试管底，对其它主要成分包括干细胞无影响。经这样处理后，实验时间相对较短（平均为1.5 h），步骤相对较少，细胞污染几率小，从而使细胞数损失减少。结论证明，与相应的干细胞分离液联合分离使用羟乙基淀粉沉淀法是一种高效的脐血干细胞分离方法。 
 
HES-TBD550 （ 羟乙基淀粉 550）
 
 
 
【产品介绍】
 
HES 是从支链淀粉衍生出来的，是富含淀粉的复合物，其生理和化学特性主要由羟乙基
 
取代度即取代级、平均分子量决定。大量实验表明平均分子量越大对红细胞的凝集作用越强，有效提高红细胞的沉降速度，从而使红细胞与其它细胞分离。故而，使用 HES-TBD550（羟
 
乙基淀粉 550）沉淀法是一种高效的细胞分离方法。
 
利用 HES-TBD550（羟乙基淀粉 550）与白细胞分离液联合使用，可以高效的使白细胞
 
与红细胞得以分离，所获得的白细胞纯度高且可保持完好的生物活性和完整的细胞形态。
 
间充质干细胞(mesenchymal stem cells ,MSCs) 是指一群可向成骨细胞、成脂肪细胞、骨髓基质细胞、肝脏细胞、心肌细胞和神经细胞等多种细胞分化的多潜能组织干细胞,是在细胞治疗、基因治疗中有效发挥作用的理想工程细胞。MSCs 不仅存在于骨髓,也可从脐血、外周血中以及脂肪组织、肌肉、胎儿器官、大脑、牙齿中分离。UCB - MSCs 的分离、筛选、增殖、分化与脐血样本的选择、培养基的差异以及分离、扩增分化过程中操作技术等多种因素有关。目前用于 UCB - MSCs 分离的方法有:贴壁筛选法、密度梯度离心法、流式细胞仪法和免疫磁珠法。流式细胞仪法对细胞损伤较大，免疫磁珠法价格相对较贵且由于抗原抗体反应也容易改变细胞原有特性，而 HES-TBD550（羟乙基淀粉 550）联合密度梯度离心法常与贴壁筛选法结合使用,可提高所得 UCB-MSCs 的纯度，目前研究多采用此法。国内不少学者采用羟乙基淀粉沉淀红细胞，然后再进行离心分离单个核细胞，也取得不错结果。实验证明采用随机数字表法，将每份脐血随机分入两个不同处理组，从而将脐血样本的个体差异减小到最小程度。结果证实，HES-TBD550（羟乙基淀粉 550）联合密度梯度离心法获得的有核细胞数量明显多于 FICOLL 密度梯度离心法。本实验采用的羟乙基淀粉商品名为
 
HES-TBD550（羟乙基淀粉 550），克分子渗透压为 308mosm／L，胶体渗透压为 68／36 mmHg,
 
可影响红细胞集聚性沉降率。红细胞集聚是可递性桥接结构形成的结果，由大的 HES-TBD550
 
（羟乙基淀粉 550）分子处在红细胞之间联接而成。HES-TBD550（羟乙基淀粉 550）同时
 
还阻碍白细胞和内皮细胞的黏附，并使平均血小板容积呈现微弱地降低，从而有轻度抑制血小板集聚的功能。脐血经 HES-TBD550（羟乙基淀粉 550）处理后，可使红细胞沉积至试管
 
底，对其它主要成分包括干细胞无影响。经这样处理后，实验时间相对较短（平均为 1.5 h），步骤相对较少，细胞污染几率小，从而使细胞数损失减少。结论证明，与相应的干细胞分离

液联合分离使用羟乙基淀粉沉淀法是一种高效的脐血干细胞分离方法。
 
【使用方法】方法一：传统方法
 
 
 
注：吸取上清用细胞洗涤液（Cat#：2010X1118）洗涤备用，用户可根据实际情况收集红细胞重复上述步骤。
 
方法二：最大数量目的细胞提取方法
 

• 取新鲜抗凝血一份与一份羟乙基淀粉 550（Cat#：HES-TBD550）混匀，30℃-37℃反应 5-10 分钟（5ml 以下样本反应 5 分钟，5ml 以上样本反应 10 分钟）。

 

• 反应后再与一份全血及组织匀浆稀释液（Cat#：2010C1119）混匀，室温（25℃-30℃）自然沉降 30 分钟。

 

• 将上清小心加于相应细胞分离液之液面上，按照相应分离液说明书方法进行离心操作；另将沉淀的红细胞用全血及组织匀浆稀释液（Cat#：2010C1119）重新悬起，并小心加于细胞分离液之液面上，按照相应分离液说明书方法进行离心操作；

 

• 离心后根据对应说明书方法收集步骤 3 中两个离心管所富集的目的细胞，获得最大数量的目的细胞。

 
 
方法三：最高纯度目的细胞提取方法
 
在使用目的细胞分离液离心分离步骤后，吸取目的细胞层，按照“方法一”中操作步骤将目的细胞提纯,弃去红细胞。
 
【产品性能指标】
 
溶液 注射用水
 
渗透压 280-340mOsmol/kg

内毒素	﹤0.5EU/ml
无菌	直接接种培养 14 天后培养基澄清
澄明度及不溶性颗粒物	每 50ml 溶液中含 10μm 以上的不溶性微粒
	20 粒以下，含 25μm 以上的不溶性微粒 5 粒
	以下
无支原体无病毒	已检测
保存期限	2 年
贮藏	4℃—25℃

 
 
【产品标准编号】
 
【注意事项】
 

• 启封后应置 4℃保存，避免微生物的污染。

 

• 整个分离过程中，温度应控制在 20℃±2℃且在无菌环境下进行，避免微生物的污染，否则会影响分离质量。

 
 
 
【参考文献】
 
［1］ Meier C, Middelanis J, Wasielewski B, et al. Spastic paresis after perinatal brain damage in rats Is reduced by human cord blood mononuclear cells［J］. Pediatric Research, 2006,59(2):244-249.
 
［ 2 ］ Boyle AJ, Schulman SP, Hare JM , et al. Stem cell therapy for cardiac