服务名称: 神经元尼氏染色实验服务
规格: 样本
价格: 35元
实验周期: 3周
收费标准/服务周期/提供结果:
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神经元尼氏染色实验服务
实验技术简介:
Franna Nissl (1860-1919) 1892年创立了Nissl染色法,以发现Nissl小体和Niss变性而闻名。常用的碱性染料有CresyI violet (焦油紫,甲.酚紫,克紫) ; thionine (硫堇); tolridine blue (甲苯胺蓝)等。尼氏体为嗜碱性物质,又称嗜染质,光镜下呈斑块状或细粒状散在均匀分布。在一些大型的运动神经元,尼氏体大而多,宛如虎皮花纹,又称“虎斑"。电镜下,尼氏体由大量平行排列的粗面内质网和其间的游离核糖体组成。尼氏体是神经元胞体细胞质的特征性结构之一,神经元胞质另外一 特征性结构为神经原纤维。
实验技术原理:
正常的神经细胞都含有一定数量的尼氏体, 它们主要分布于神经细胞的浆中,形状有大有小,如三角形,有的为椭圆形。这些物质能被大部分的蓝色染料所染色,这些染料如焦油坚牢紫(Cresyl fast violet)亚甲蓝(methylene blue)甲苯胺蓝(toluidine blue)硫董(thionin) 等钭其染为蓝色。但是,当神经细胞受伤后,胞质内的尼氏体更可发生变化,严重的可消失。
实验操作流程:
1、切片脱蜡至水
2、用焦油坚牢紫水溶液浸染20-30分钟
3、水洗
4、用95%酒精分化
5、无水酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶
实验结果:
神经细胞单位:紫-蓝色细胞核:紫蓝色尼氏体:紫深蓝色
实验操作流程:
1、切片脱蜡至水
2、用焦油坚牢紫水溶液浸染20-30分钟
3、水洗
4、用95%酒精分化
5、无水酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶
实验注意事项:
客户提供:
1、组织样品:新鲜组织放入液氮或-80度保存,组织不少于100mg;
2、培养细胞:通过细胞计数取不少于2x106个细胞于EP管,加入0 .5ml生理盐水或蛋白保护剂,混沟后保存于冰箱(-80°C, 避免反复冻融) ;
3、血液细胞标本:以抗凝管保存血样或以淋巴细胞分离液分离细胞后加入0.5m生理盐水或蛋白保护剂,保存(-80°C可长期保存,避免反复冻融) ;
4、血清或细胞培养液标本:离心去掉杂质后取上清入EP管,保存(49C可保存15-20天,-80°C可长期保存,避免反复冻融) ;
5、石蜡切片,冰冻切片以及细胞爬片,涂片等。
6、样本运输:可选择以下任何-种方式寄送标本
组织样本、细胞样本以干冰运输或加入蛋白保护剂后,加冰袋寄送;
细胞样本也可直接寄送培养瓶(密封保证不污染、培养液不漏出) ;
血清或上清液直接加冰袋寄送(送视路程远近2 -3天可到达)。
交付标准:
1、图片;
2、完整项目报告(材料、试剂、仪器、方法、数据分析、实验结果)。
其他:
1、应用酒精分化切片,要迅速,防止过度分化,将切片上的颜色全部脱掉。
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