服务名称: RNAi服务
规格: 询价
价格: 1000元
实验周期: 2-4周
收费标准/服务周期/提供结果:
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RNAi技术服务
实验意义
1.可应用于阐明基因组结构与功能以及基因之间相互作用的科学,对于探索基因在生命活动中的作用及其机制具有重要意义。
2.能够为一些疾病提供新的诊断方法和治疗方法,可有助于医生获得更多治疗信息并进行个性化精准医疗。
实验原理及步骤
1. siRNA的设计和选择:根据研究目的选择合适的数据库及软件筛选靶序列的siRNA,通常需要设计多个siRNA,找到zui优zui有效的siRNA序列;
2. siRNA的制备:常用的体外制备方法有化学合成、体外转录、长片段dsRNA经RNase Il类降解,以及通过siRNA表达质粒载体或者病毒载体以及PCR制备的siRNA表达框架(siRNA expression cassettes, SECs)在细胞中表达制备siRNA;
3. siRNA的转染: siRNA. siRNA表达载体或者siRNA表达框架转染进入细胞的方法主要有磷酸钙共沉淀转染、电穿孔转染机械法(显微注射和基因枪) . 阳离子脂质体试剂转染;
4.检测靶基因的表达: WB等方法检测靶基因的表达或者可以通过标记siRNA(如荧光标记)分析其表达,还可用作siRNA胞内定位和双标记实验来追踪转染过程以及靶基因表达沉默过程。
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实验周期及交付标准
1.实验周期: 2-4周
2.交付标准:质粒、片段验证结果、实验报告(实验步骤.试剂、仪器等)
需确认的信息
1.基因的种属及ID号
2.基因序列
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实验代做: